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新闻动态

什么原因会造成高效液相色谱无法定性

点击:31 日期:2020-11-30 11:17:52

保留时间重现是高效液相色谱性能好坏的一个重要标志,同一种物质两次的保留时间相差不要超过15s,超过了30s可看作保留时间漂移,会使高效液相色谱无法进行定性。

1、环境温度不稳定。保留时间重现需要稳定的温度,通常实验室温度的改变以及环境大气压的变化会导致保留时间的漂移,因此,每天的实验室温差应控制在3℃以内。

2、流动相组成的缓慢变化。流动相组成的缓慢变化是保留时间漂移的常见原因,例如,pH值过高或过低、流动相没有混匀、流动相中有挥发成分。

3、色谱柱的污染。色谱柱的污染是保留时间漂移的另一个常见原因,高效液相色谱柱可以过滤并吸附流动相携带的任何物质,当柱头污染时,污染物将延长样品的保留时间。

4、系统平衡。若压力稳定而保留时间呈有规律变化,多数是色谱柱未平衡好,特别是含有的流动相,需较长时间去平衡。系统平衡通常需要10~20个柱体积的流动相,而离子对试剂则需要50倍柱体积的冲洗才能平衡,一般需要用流动相平衡柱子30min,然后用标准品重复进样看保留时间是否基本平衡,当保留时间基本平衡后再进样品。